（一）病原学检查
发病一周内取血液，第二周以后取尿，有脑膜炎型症状者取脑脊液进行检查。
1．显微镜检查 直接镜检： 取抗凝血1000转/分、离心10分钟，除去血细胞；血浆再以10000转/分，离心40分钟，弃上清取沉淀物暗视野显微镜检查。染色镜检：涂片后用Fontana镀银染色镜检。另外，还可用免疫荧光法或免疫酶染色法检查。
2．分离培养与鉴定 将血液数滴接种于柯氏（Korthoff）培养基（4.5～5ml），每份标本接种2～3管，于30℃培养5天，每隔3～5天，用暗视野显微镜检查一次。如有钩体生长，再传代培养，用生长良好的菌液作鉴定，阴性者至少培养30～40天，仍未查到才能报告。尿液标本一般需浓缩（离心）后培养，培养时需加抑菌剂如5-氟尿嘧啶等；也可将标本接种于豚鼠腹腔进行分离。
（二）血清学试验
一般在病初及发病2～3周各采血一次进行下列试验。
1．显微镜凝集试验
是目前常用的方法，用标准株或当地常见菌侏作抗原，分别与病人不同稀释度的血清混合，在37℃作用2小时，然后滴片作暗视野显微检查。若待检血清中有某型抗体存在，则在同型抗原孔中可见钩体凝集成团，形如小蜘蛛，一般病人凝集效价在1：400以上或晚期血清比早期血清效价高4倍以上有诊断意义。
