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(2010-11-19)
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方法与步骤
(一)接种。
1.试管菌种转接：
试管细菌菌种转接主要用于菌种的活化、分离、纯化。
(1)将菌种试管与待接种的试管培养基依次排列，挟于左手的拇指与其他四指之间，用右手的无名指与小指和手掌边拔出棉塞并挟住。
(2)置试管口于酒精火焰附近。
(3)将接种工具垂直插入酒精火焰中烧红，再横过火焰3次，然后再放入有菌试管中，在管壁上停留片刻待其冷却。
(4)取少许菌种置于另一支试管中，按一定的接种方式把菌种接种到新的培养基上。
(5)取出接种工具，试管口和棉塞进行火焰灭菌。
(6)重新塞上棉塞。
(7)烧死接种工具上的残余菌，把试管和接种工具放回原处。
(8)在斜面管口写明菌种名称、日期，置37℃恒温培养18—24小时，进行观察。
2.试管菌种接种到平板培养基：
试管细菌菌种转接到平板培养基主要用于菌种的分离、纯化。
(1)左手持试管菌种，右手松动试管棉塞，烧接种工具。
(2)右手小指与手掌边取下棉塞，取菌，打开平皿。
(3)将菌种接种到平皿上，采用平板划线法(分区划线或连续划线)，然后立即盖上平皿。
(4)在酒精灯火焰上灼烧接种工具灭菌。
(5)棉塞过火，重新塞入试管。
(6)在平皿底写明菌种名称、日期，倒置于37℃恒温培养18—24小时，进行观察。
3.液体培养基接种
液体培养基接种主要用于微生物的增菌培养。
(1)用灭菌的接种环挑取细菌菌种迅速移到肉汤培养基管，涂于接近液面的倾斜的管壁上，并轻轻研磨，再直立试管，菌种即溶于肉汤中。
(2)灼烧接种环，放回原处。两试管口经火焰灭菌后塞上棉塞。
(3)在斜面管口写明菌种名称、日期，直立于37℃恒温培养24小时，进行观察。
4.半固体培养基接种
半固体培养基接种主要用于检查细菌的运动性。
(1)按试管菌种转接法握持菌种管和半固体培养基管，靠近火焰。
(2)将接种针在火焰上烧灼灭菌，冷却后从菌种管中挑取少许大肠杆菌菌苔，迅速移至肉汤琼脂半固体培养基管中。
(3)将接种针从培养基础中央垂直剌入至管底3/4处，然后原路退出。接种针不能在培养基中左右移动。
(4)试管口经火焰灭菌后，塞上棉塞。灼烧接种针。用同样方法接种一管金黄色葡萄球菌做对照。
(5)在半固体培养基管上写明菌种名称、日期，直立于37℃恒温培养24小时，进行观察。
